:南通大学公共卫生学院,江苏 南通;徐惠林:南通市海门区人民医院药剂科,江苏 南通
碘是人体的必需微量元素之一,有“智力元素”之称 [1] 。碘在人体的首要生理功能有:调理蛋白质的组成和分化;调理水盐、维生素代谢吸收;促进胎儿和婴幼儿的生长发育等 [2] [3] 。健康成人体内碘的总量为20~50 mg,引荐摄入量为150 μg/d,其间70%~80%浓集在甲状腺中,90%经过尿液排出,尿碘水平是判别人体碘营养情况最灵敏的目标 [4] 。依据《我国居民补碘攻略(2018)》 [5] 成人和儿童尿碘中位数100~199 μg/L为适合量,尿碘中位数小于20μg/L为严峻缺少,不小于300 μg/L时为碘过量,碘的缺少或高碘摄入对人体都有损伤,常见于甲减、甲亢、甲状腺肿大等疾病,引荐14岁以上健康青少年及健康成人每天摄入碘量为120 μg,孕妈妈和哺乳期妇女所需的量要比一般正常人多,约为220 μg。所以监测尿碘的含量对防备甲状腺疾病和科学补碘有重要的含义 [6] [7] [8] 。
测定尿碘的办法首要有WS/T107.1-2016砷铈催化分光光度法(国标手艺法) [9] 、离子挑选电极法、电感耦合等离子体质谱法、气相色谱法、中子活化法等,许多办法在尿碘含量小于50 μg/L时,测定成果准确性、共同性较好。在高浓度时,国标法分光光度差错最小,但其操作繁琐、消耗时刻、触摸有毒试剂、试验简单失利 [10] ;选用大型仪器电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)检测,回忆效应强、费用贵重、操作要求高 [11] 。跟着主动化的开展,在国标法的基础上运用全主动尿碘剖析仪,能有效地进步测定尿碘的速度,主动加完尿样后主动消解和检测,简直无人员操作差错,对设备、试剂和人员要求不高,被广泛收购和运用到底层试验室中 [12] [13] 。
仪器主动加消解液过硫酸铵溶液1000 μL,消解温度为105℃,消化60 min,平衡时刻30 min,反响温度为20℃~35℃,挑选0~300 μg/L浓度结尾丈量办法,丈量单位为μg/L,小数点位数为3,LED光源波长λ = 400 nm,R1为亚砷酸溶液300 μL,平衡300 S,R2为硫酸铈铵50 μL,平衡1800 S,读数时刻为30 S,曲线. 试验原理
加样后,仪器主动消化,选用过硫酸铵和水反响生成酸性过氧化氢,过氧化氢在高温下使尿中有机物氧化分化,一起过硫酸铵自身在高温下分化发生原子态氧,分化尿中的有机物:(NH4)
AsO3+ 2Ce4++ H2O → H3AsO4+ 2Ce3++ 2H+,反响中黄色的Ce4+被还原成无色的Ce3+,碘含量越高,反响速度越快,所剩的Ce4+则越少。操控反响温度和反响时刻,比色测定系统中剩下Ce4+的吸光度值,运用碘的质量浓度C与相应测得的吸光度值A之间的定量联系C = a + blgA核算出碘含量。2.4. 试验办法
送检尿样不少于5 mL,置于聚乙烯塑料管或玻璃具塞试管中,以防止蒸腾。室温下能够保存2周,4℃能够保存2个月,−20℃能够保存4个月。翻开剖析仪、外接超级循环水浴,进行仪器系统预热和管路润洗;汲取250 μL尿样和规范系列放入水浴中的样品架上,仪器主动参加过硫酸铵溶液混匀,105℃条件下主动加热消解1小时;冷却后主动增加反响试剂,控温控时进行反响,得到样品吸光度,回归曲线核算浓度值,完结样品的全主动化检测。
依照仪器作业条件测定规范溶液系列,以碘的质量浓度C (μg/L)为X横坐标,吸光度值A的对数值为Y纵坐标制作曲线,取得规范曲线 μg/L以内,线性回归方程为
=−449.4465Y+142.9326,相联系数为0.9999,见。接连丈量10次挨近空白的尿样吸光度,以吸光度值规范差错的3倍核算此法的检出限,成果为2 μg/L (以取0.25 mL尿样计),与手艺法比较,办法灵敏度较高,检出限值低。
取高、中、低3个不同浓度的尿样,依照试验办法重复测定6次,核算测定值的相对规范差错(RSD),RSD在1.2%~2.9%,小于3%,精密度杰出,见表1。
对此3个浓度的尿样参加一定量的碘,进行加标收回试验,收回率在94.0%~108.0%,见表2。
,所得测定值分别为80.5 μg/L,225.8 μg/L,均在确定值的不确定度规模内。
全主动碘剖析仪与规范法在办法原理上是共同的,线 μg/L,其长处关键是完成了主动化增加试剂,进步了检测速度,防止操作人员和有毒试剂非直触摸摸,见表3。
= 2.5 3.84,P 0.05,阐明两组数据差异无统计学含义,其相对差错值小于10%契合国家碘缺少病参照试验室质量操控要求。
仪器操作前要保证清洗水和试剂足量,假如试剂冷藏保存,需取出平衡30 min至室温;试剂针和样品针要清洗,保证液路中无气泡,运转完毕要屡次清洗比色盘,排空仪器水路;每批样品均需一起做规范曲线及空白;试验环境污染操控要远离高碘物质,试验前用1%硫代硫酸钠溶液擦洗桌面和地上;容器器皿不必消毒剂和洗涤剂清洗,要放入10%盐酸 + 5%氯化钠溶液中浸泡24小时,再用去离子水冲刷2~3次,晒干备用;所用试剂亚砷酸有毒,需求慎重保管,过硫酸铵性质不稳定,溶液宜避光冷藏保存,固体易潮解,干燥器保存;正常的过硫酸铵固体试剂为颗粒状、通明状晶体,若运用已风化或潮解的过硫酸铵固体试剂,将或许致使尿样消化作用不抱负和致使作业曲线碘空白管的吸光度值很小、曲线斜率小而趋于平整、尿样的测定成果差错增大;当空白管吸光度值很小(A 0.700)时,应当查看反响系统:所用试剂、水、器皿、试验环境是不是真的存在碘污染。
实践收集2022~2023年南通市(海门区)共1777份尿样,经全主动碘剖析仪测定数据剖析。尿碘的测得规模:2022年为10.65~596.38 μg/L,2023年为21.21~495.98 μg/L;中位数:2022年为206 μg/L,2023年为200 μg/L。详细频数散布见表5,可见尿碘浓度在100~299 μg/L占比约70%,频数散布最多,这与文献查询的某区域孕妈妈和学生的尿碘成果情况也相契合 [14] [15] [16] ,反映在集体层面海门区人群碘含量为适合量偏高的水平,为高碘区域散布。
比较有文献在国标手艺法的测定条件 [17] [18] [19] 和抗干扰试验 [20] 方面的讨论改善,使用全主动碘剖析仪测定尿碘,与国标手艺法比较本法检出限值低,精密度、准确度和线性相关性要好。由仪器操控试剂用量、反响时刻、反响温度等,削减人为操作影响,完成了主动化,进步了检测功率,能满意底层大批量样品检测的需求。测定了海门区共1777份尿样,数据反映海门区人群中碘含量水平处于较好、大于碘适合量的水平,这与人们食用加碘盐的认识增强以及近年来国家碘缺少病参照试验室的宣传作业是严密相关的。